Anne Gesthuysen wurde am 2. Oktober 1969 in Geldern geboren. Nach Besuch des Stiftsgymnasiums in Xanten studierte sie Journalistik an der Universität Dortmund.
In den Jahren 1990 und 1991 absolvierte sie ein Volontariat beim Westdeutschen Rundfunk (WDR) in Köln. Gesthuysen moderierte die „Aktuelle Stunde“ (2001 bis 2004) und von 2002 bis 2014 das ARD-Morgenmagazin. 2012 heiratete sie Frank Plasberg, den Moderator der ARD-Sendung „hart aber fair“.